CITOGENÉTICA MOLECULAR

 ¿Qué es la citogenética molecular?

La citogenética molecular combina genética molecular y citogenética para estudiar la estructura y función de los cromosomas a nivel molecular, utilizando técnicas avanzadas como FISH, PCR, microarrays y secuenciación de ADN para analizar alteraciones cromosómicas como translocaciones, inversiones, deleciones y duplicaciones.

¿cuál es el origen de la citogenética?

La citogenética tiene sus inicios en los estudios de Theodor Boveri y Walter Sutton a finales del siglo XIX y principios del XX, quienes establecieron la relación entre los cromosomas y la herencia genética. A lo largo del siglo XX, se desarrollaron técnicas de tinción cromosómica y, más tarde, métodos avanzados como FISH y secuenciación de ADN. Estos avances sentaron las bases para el estudio de los cromosomas a nivel molecular y la comprensión de su importancia en la genética y la herencia.

¿Cuales son los cambios cromosómicos que más se ven reflejados en los estudios?

-Cambio cromosómico primario: Relacionado con la transformación maligna, este tipo de cambio está vinculado a mecanismos moleculares que desencadenan la neoplasia.

-Cambios cromosómicos secundarios: Ocurre en etapas avanzadas de la enfermedad, llevando a un curso más agresivo y resistente a la terapia, lo que dificulta lograr una remisión completa o duradera. El pronóstico empeora con un mayor número de anomalías cromosómicas.

-Presencia o ausencia de células citogenéticamente normales en médula ósea: Los pacientes con células anormalmente cariotipadas tienen un pronóstico más desfavorable en comparación con aquellos con células normales.

-Presencia de dobles diminutos (DMS) o regiones de tinción uniforme (HSR): Asociados con amplificaciones génicas, estos cambios cromosómicos predicen un mal pronóstico y mayor resistencia a la terapia.

-Cambios cromosómicos numéricos: Algunas leucemias están relacionadas con alteraciones numéricas de los cromosomas. Estos cambios, cuando son los únicos presentes, pueden tener un valor pronóstico similar a los cambios primarios, como translocaciones o deleciones.

Tecnicas de hibridación

La técnica de hibridación in situ (HIS) es capaz de detectar y ubicar secuencias específicas de ADN o ARN en muestras cromosómicas, extensiones celulares o cortes de tejido que se examinan bajo un microscopio. Su uso ha aumentado recientemente como un complemento a las técnicas de citogenética tradicional. Aunque la citogenética tradicional permite ver todos los cromosomas, tiene limitaciones, como la necesidad de células en división y la posibilidad de evaluar solo unas pocas metafases.

Por otro lado, a veces los cromosomas tienen bandas poco definidas, lo que dificulta determinar su cariotipo debido a una calidad morfológica deficiente. En estos casos, no es posible detectar alteraciones cromosómicas que afecten regiones genéticas muy pequeñas utilizando las técnicas citogenéticas convencionales. Para abordar esta limitación, se recurre a las técnicas de hibridación in situ (HIS) como complemento.

La metodología de estas técnicas implica la desnaturalización del ADN de la muestra y de la sonda utilizada, seguida de la hibridación entre ambos para que se unan por complementariedad de bases. La interpretación del resultado se realiza a nivel microscópico, considerando el tipo de sonda empleada.

En los años 90, se introdujeron las técnicas de HIS en el laboratorio de hematología para el diagnóstico, pronóstico y seguimiento de neoplasias hematológicas. Se emplearon sondas como las centroméricas, las de pintado cromosómico y las de secuencia única. Estas últimas se consideran "convencionales" por su uso generalizado. Recientemente, han surgido nuevas tecnologías de HIS, como la Hibridación Genómica Comparada (HGC), el Multicolor-FISH (M-FISH) y el Spectral Karyotyping (SKY), con el fin de superar las limitaciones de las sondas convencionales y proporcionar una mayor información sobre el cariotipo.